优诺Tabitha®氨基柱有专用的反相模式柱和正相模式柱,建议客户专柱专用,在特别的情况下也可以同一支柱子在正相反相间切换,切换时用异丙醇作为过渡溶剂过渡。
反相模式柱出厂保存在纯乙腈中,正相模式柱出厂保存在正己烷中,正相溶剂和反相溶剂往往是不互溶的, 需要特别留意,所以在使用前后要注意如下事项:
PH范围:2-8
柱温:最高不超过60度
有机溶剂:最低不能低于60%的体积比
压力:不超过3500PSI
使用中,不宜分析含醛基、羰基的化合物,不可用于还原糖的分析;
考察流动相条件时,建议pH由高到低的顺序考察。
在pH<2条件下使用色谱柱后,填料表面有无法回到初始状态的风险。
有时候需要长时间平衡色谱柱。
平衡所需时间与流动相的用量和盐的浓度有关,时间紧急时,建议提高流速或pH不变增加盐的浓度来进行平衡。
样品溶液的制备:
如可以的话,用流动相来溶解或稀释样品;如不可以,请先检查溶解后的样 品在流动相中的溶解度;进样前需使用 0.45 或 0.22µm 的滤膜过滤样品;
再生:
- 正相条件:
依次用10倍柱体积的氯仿,异丙醇,二氯甲烷,流动相分别进行冲洗,如有压力高现象,可按此程序进行反冲色谱柱。
- 反相条件:
先用95%水:有机相冲洗至少10倍柱体积,除去所用缓冲盐(不含缓冲盐的流动相可省去此步骤),再用95%有机相/水冲洗至少10倍柱体积并保存。
短期不用,可保存在反相溶剂中;长期不用,需用异丙醇保存。
Views: 1557